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關(guān)于操作康寧基質(zhì)膠的溫馨提示

發(fā)布日期: 2022-06-21
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   康寧基質(zhì)膠為一種從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出的基底膜基質(zhì),主要成分包含層粘連蛋白、IV型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。鑒于基質(zhì)膠的操作環(huán)境要求比較嚴(yán)格,為保證您的實驗順利,特此對以下幾個方面進(jìn)行溫馨提示:
  1.收貨時,首先確認(rèn)還有干冰,基質(zhì)膠成固態(tài),液面水平,如有異常請及時拍照取證并聯(lián)系我們;
  2.整個基質(zhì)膠只能分裝一次,在分裝前,要先放在4℃冰箱(最好先把基質(zhì)膠插在冰上,然后放入4℃冰箱)一段時間待之融化(切記不要放在冰箱門上或者是經(jīng)常要敞開口取放試劑的冰箱),且分裝用的槍頭、EP管等都要提前-20℃預(yù)冷(因為基質(zhì)膠在10℃以上即會發(fā)生成膠凝固導(dǎo)致基質(zhì)膠報廢),整個分裝過程要在冰上進(jìn)行,且以后每次實驗時拿出本次用量的已經(jīng)分裝好的基質(zhì)膠用,該次實驗用不完的基質(zhì)膠要扔掉,不可以留作下次使用;
  3.實驗人員的手心不要接觸基質(zhì)膠,如:要手持裝有基質(zhì)膠的EP管的上方,防止體溫使基質(zhì)膠成膠凝固;
  4.平?;|(zhì)膠的濃度是8-12mg/ml,高濃度的基質(zhì)膠的濃度是18-22mg/ml,具體濃度可通過貨號查詢;
  5.以24孔板為例,做腫瘤細(xì)胞侵襲實驗時每孔加入基質(zhì)膠20-30ug(一般配成200-300ug/ml的工作濃度,然后每孔加入100ul即可)。此時,基質(zhì)膠是100ul即可)。此時,基質(zhì)膠是稀釋到很低的倍數(shù)(有的實驗需要低至30倍稀釋,具體最適濃度需根據(jù)自己的實驗進(jìn)行優(yōu)化)。鋪膠后置于37℃提升箱放置1小時,取出后如果上層有液態(tài)提升基,需小心棄去上層的液態(tài)提升基即可使用(此時基質(zhì)膠沉在底部形成一小薄層)。
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